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什么是生物顯微鏡?怎么使用?

2020-09-04 09:35:06

生物顯微鏡是用來觀察生物切片、生物細(xì)胞、細(xì)菌以及活體組織培養(yǎng)、流質(zhì)沉淀等的觀察和研究,同時(shí)可以觀察其他透明或者半透明物體以及粉末、細(xì)小顆粒等物體。主要應(yīng)用于食品廠、飲用水廠、醫(yī)院、制藥企業(yè)。

 

歷史

公元1680年,一個(gè)在荷蘭德夫特的市政廳門房干了幾十年門衛(wèi)工作的半老頭子,卻被當(dāng)時(shí)歐洲乃至世界科技界頗具權(quán)威的英國皇家學(xué)會(huì)吸收為正式會(huì)員;接著,英國女王親筆給他寫來了賀信。一時(shí),他從一個(gè)*普通、*平凡的人霎時(shí)間變成了震驚世界的名人。他的主要業(yè)績,就是經(jīng)過自己幾十年堅(jiān)韌不拔的努力和探索,發(fā)明了世界醫(yī)學(xué)史上*架幫助人類認(rèn)識自然、駕馭自然、打開微觀世界大門的顯微鏡,從此,他的這一業(yè)績時(shí)時(shí)深刻地影響著人類的生命和生活。這個(gè)令世界震驚的小人物就是1632年出生于荷蘭德夫特一個(gè)普通工匠家庭,而后成為荷蘭**微生物學(xué)家的列文虎克。

列文·虎克

 

  早年的列文虎克由于父親的早逝,媽媽無力負(fù)擔(dān)他求學(xué),16歲時(shí),就來到首都阿姆斯特丹的一個(gè)雜貨鋪里當(dāng)了學(xué)徒。雖然天天早起晚睡,干著臟活累活,然而,他卻并沒有多少的怨言,因?yàn)閬淼竭@里雖然時(shí)間不長,他卻有幸結(jié)識了雜貨鋪對面一位和善的老大爺。老人家中藏書豐富,博學(xué)多識,他給年輕的列文虎克(出生于1655年)講了許多充滿神奇色彩的新鮮而有趣的故事,這使列文虎克懂得了想要知道的關(guān)于大自然奧秘的許多東西。于是,他一有空暇就向老人求教,在老人那里借閱圖書,老人也非常喜歡這個(gè)愛讀書、愛提問的好孩子。后來,在一天深夜,他正在伏案讀書時(shí),被隔壁眼鏡店作坊的工匠磨制鏡片的沙沙作響的聲音吸引住了。他放下手中的書本,悄悄來到眼鏡作坊里。他望著工匠們磨出的一塊塊鏡片,腦際突然浮現(xiàn)出一個(gè)奇怪的念頭:如果能磨出一塊特殊的鏡片,讓我們能看清許多用肉眼看不清、看不到的東西該多好哇!就是這樣一個(gè)靈感似的奇想,竟從此使他下定了磨制一塊“魔鏡”的決心。從此以后,列文虎克拜一位老工匠為師,虛心求教。有一天,這位老師傅給列文虎克講了這樣一件事:老師傅的孫子有一天偶爾將兩塊磨制好的透鏡疊在一起放在一張廢紙上看上面的字,只見這些字比原來的大好多倍,老師傅馬上拿過這兩塊鏡片放在孫子頭上看頭發(fā),突然發(fā)現(xiàn)頭發(fā)像鐵絲一樣粗。老師傅講的這件事引起列文虎克的極大興趣,他發(fā)誓一定要磨制出比眼鏡鏡片更精制、用途更廣泛的鏡片。為了達(dá)到目的,他的手磨破了,腿跪麻了。有時(shí),手指上的鮮血順著磨破的傷口流淌,浸濕了鏡片。有時(shí),他磨至深夜也毫無倦意,實(shí)在累了,就蜷縮在屋角和衣而臥。功夫不負(fù)有心人,一滴汗水換來一份收獲,他辛勤地勞動(dòng)*后結(jié)出了豐收的果實(shí),他終于磨成了兩塊光亮精巧的透鏡。他將鏡片疊起來看雞毛,只見一根雞毛上被放大了的絨毛像樹枝一樣排列著。接著,他試著將重疊在一起的兩塊鏡片間的距離上下變化,只見隨著鏡片間距離的變化,直接影響著觀察的效果。那么,怎樣將這兩塊鏡片各自固定起來,同時(shí)又能自由地上下調(diào)節(jié)距離呢?一個(gè)新的難題又?jǐn)[在了他的面前。為了解決新的難題,列文虎克一連幾天苦苦地思索著。一天,他在干完雜貨鋪的工作后來到大街上,邊走邊思索。忽然間,他被一陣丁丁冬冬的響聲所吸引,猛然抬頭往左一看,是一家鐵鋪在打鐵。于是他來到鐵鋪里,看到了鐵匠們打制出的一件件鐵器。這時(shí),他忽而又想到:如果能讓鐵匠打制一個(gè)鐵架和一個(gè)鐵筒,將鏡片固定在鏡筒的兩頭,然后再固定在鐵架上,這樣觀察不是既省力又方便嗎?想法既出,馬上他就找了鐵匠師傅,將自己的想法告訴他們。沒過幾天功夫,列文虎克按照自己的設(shè)想所發(fā)明的*架顯微鏡終于誕生了。正當(dāng)他帶著勝利的喜悅準(zhǔn)備磨制更精密的顯微鏡的時(shí)候,他卻被雜貨鋪的老板以不務(wù)正業(yè)之名開除了。為了謀生,他只好輾轉(zhuǎn)回到了故鄉(xiāng)德夫特,好不容易經(jīng)人介紹在市政廳的門房找到了一個(gè)當(dāng)門衛(wèi)的差事。他一面看門,一面繼續(xù)著他對顯微鏡的研制、改造工作。幾年之后,他終于又研制出多臺更精制、**的顯微鏡。同時(shí),他運(yùn)用自制的顯微鏡,*次發(fā)現(xiàn)了血液里的血液細(xì)胞和生物王國中神奇多彩的微生物世界。于是,他將自己研制的顯微鏡和所發(fā)現(xiàn)的關(guān)于血液細(xì)胞和微生物的觀察實(shí)驗(yàn)記載寄給了英國皇家學(xué)會(huì)。不久,他的成果終于被世界承認(rèn)了。從此,這一關(guān)系著人類生命與生活的重要學(xué)問--微生物學(xué)的研究開始步入了突飛猛進(jìn)的發(fā)展的新世紀(jì)。

 

工作原理

(一) 折射折射率
  光線在均勻的各向同性介質(zhì)中,兩點(diǎn)之間以直線傳播,當(dāng)通過不同密度介質(zhì)的透明物體時(shí),則發(fā)生折射現(xiàn)象,這是由于光在不同介質(zhì)的傳播速度不同造成的。當(dāng)與透明物面不垂直的光線由空氣射入透明物體(如玻璃)時(shí),光線在其介面改變了方向,并和法線構(gòu)成折射角。

(二) 透鏡的性能
  透鏡是組成顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)的*基本的光學(xué)元件,物鏡目鏡聚光鏡等部件均由單個(gè)和多個(gè)透鏡組成。依其外形的不同,可分為凸透鏡(正透鏡)和凹透鏡(負(fù)透鏡)兩大類。
  當(dāng)一束平行于光軸的光線通過凸透鏡后相交于一點(diǎn),這個(gè)點(diǎn)稱"焦點(diǎn)",通過交點(diǎn)并垂直光軸的平面,稱"焦平面"。焦點(diǎn)有兩個(gè),在物方空間的焦點(diǎn),稱"物方焦點(diǎn)",該處的焦平面,稱"物方焦平面";反之,在象方空間的焦點(diǎn),稱"象方焦點(diǎn)",該處的焦平面,稱"象方焦平面"。
  光線通過凹透鏡后,成正立虛像,而凸透鏡則成正立實(shí)像。實(shí)像可在屏幕上顯現(xiàn)出來,而虛像不能。
(三) 凸透鏡的五種成象規(guī)律
  1. 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距以外時(shí),則在象方二倍焦距以內(nèi)、焦點(diǎn)以外形成縮小的倒立實(shí)象;
  2. 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距上時(shí),則在象方二倍焦距上形成同樣大小的倒立實(shí)象;
  3. 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距以內(nèi),焦點(diǎn)以外時(shí),則在象方二倍焦距以外形成放大的倒立實(shí)象;
  4. 當(dāng)物體位于透鏡物方焦點(diǎn)上時(shí),則象方不能成象;
  5. 當(dāng)物體位于透鏡物方焦點(diǎn)以內(nèi)時(shí),則象方也無象的形成,而在透鏡物方的同側(cè)比物體遠(yuǎn)的位置形成放大的直立虛象。

 

使用與維護(hù)方法

生物顯微鏡是應(yīng)用*廣泛的一種顯微鏡,在使用過程中如果位用和維護(hù)不當(dāng),常會(huì)出現(xiàn)一些問題,或者不能達(dá)到儀器的應(yīng)有的效果。所有這些情況,有的是由于使用不當(dāng)所致,有的是由于維護(hù)不苗,長年失修引起的。因此對顯微鏡的合理使用和妥善維護(hù)是非常重要的一環(huán).下面把生物顯微鏡的使用與維護(hù)方法介紹如下:
(1)在使用顯微鏡時(shí),首先要根據(jù)使用要求,選用適當(dāng)?shù)姆糯蟊稊?shù)。顯微鏡的總放大倍數(shù)即是:物鏡放大倍數(shù)乘上目鏡放大倍數(shù)。

(2)將各倍率的物鏡館順序裝在轉(zhuǎn)換器人在物鏡安裝前一定要將物鏡的螺紋相接觸端面以及轉(zhuǎn)換器的螺孔和接觸面部力均形清潔處理,不允許有任何灰塵存在,否則,會(huì)造成安裝不良而影響光學(xué)系統(tǒng)和成象質(zhì)量。接著將目鏡插入目鏡簡中,等待觀察使用。

(3)把所要觀察的標(biāo)本切片放置在工作臺面并用壓片器講標(biāo)本切片夾好,如有移動(dòng)尺的顯微鏡可用夾片器將標(biāo)本切片卡住,不然當(dāng)移動(dòng)尺作縱向或橫向移動(dòng)時(shí),觀察的象質(zhì)不穩(wěn)定,當(dāng)然這也行可SE6由1:移動(dòng)尺本身質(zhì)量不好所鉸。如有象質(zhì)不穩(wěn)定時(shí),則i7作適量的微調(diào)即能彌補(bǔ)這個(gè)缺陷。如果發(fā)現(xiàn)微調(diào)值太大時(shí),這說明移動(dòng)尺作縱向或橫向移動(dòng)的軌跡踐不平行于工作臺面,或可能是工作臺面的不平度。在這種情況下,應(yīng)持顯微鏡送檢修單位進(jìn)行修理。

(4)在觀察標(biāo)本切片時(shí),需要有一定的照明,其照明的光源有自然光源和人工光源兩種,不管用那種光源,為使在觀察時(shí)能得到清晰的物象,其兌度必須適中。要得到適中的亮度,可以從幾個(gè)方面進(jìn)行調(diào)節(jié):一方面可以選用平面的或凹面的反光鈕,舊時(shí)又可以轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡的位置而陵得到不同的亮度。比如說,當(dāng)光線比較暗時(shí),可選用凹面反光鈾以便外來的光線進(jìn)行會(huì)聚合提高亮度。當(dāng)光線比較強(qiáng)時(shí),則選用平面反光鏡,這時(shí)反光鏡僅使光線轉(zhuǎn)向作用,但在這里要特別注意的是千萬不能將太陽光直射反光鏡,這樣會(huì)使人目眩反而觀察不清,*好利用白云或藍(lán)天反射過來的光線比較好。

另一方面如有聚光鏡的顯微鏡。則可將聚光鏡作上下移動(dòng)使其亮度適中,另外也可以改變光闌的孔徑以達(dá)到適中的亮度。如果光線太暗時(shí),則可將聚光鏡作適當(dāng)?shù)南蛏仙?,可變光闌的孔徑作適當(dāng)?shù)姆糯?。如果光線太強(qiáng)時(shí),則可將聚光鏡作適當(dāng)?shù)南陆?,可變光闌的孔徑作適當(dāng)?shù)臏p小。假如在這種情況下還感到極限,那么可選用適當(dāng)?shù)臑V光片放置在聚光鏡下的托架上。這樣就能獲得使你滿意的亮度。當(dāng)然在調(diào)節(jié)聚光鏡的上下位置和可變光闌的孔徑大小以及選用適合的濾光片,那是要經(jīng)過一定時(shí)期的實(shí)踐而取得經(jīng)驗(yàn)的。

(5)在觀察標(biāo)本切片時(shí),必然要進(jìn)行調(diào)角,首先是粗調(diào),而后是微調(diào)。在粗調(diào)時(shí)應(yīng)根據(jù)不同倍率物鏡的工作距離作粗調(diào)的調(diào)節(jié),接著用眼觀察日鏡作粗調(diào),直至能看到標(biāo)本的輪廓后再進(jìn)行微調(diào),直至調(diào)至物象*清晰為止。粗調(diào)有時(shí)候由于長期使用而感到過松時(shí),則可用手緊握一只極動(dòng)手輪,而另一只手轉(zhuǎn)動(dòng)另一只粗動(dòng)手輪,以作適當(dāng)?shù)恼{(diào)節(jié)即可。有時(shí)在粗微調(diào)的某一段有松緊戒不舒適時(shí),則可適當(dāng)?shù)刈儞Q粗微調(diào)的位置。在使用高倍物鏡時(shí),一般來說,由于高倍物留的工作距離比較短,所以在調(diào)焦時(shí)應(yīng)采用微調(diào),這樣才不至于會(huì)由于調(diào)焦不小心而使物境碰撞切片,甚至于使鏡頭損壞。盡管高倍物鏡設(shè)計(jì)有彈簧鏡頭(就是物鏡前片在接觸切片后有彈簧伸縮的),不至于物鏡與切片須碰,但調(diào)焦時(shí)還是要謹(jǐn)慎小心為好。

(6)在觀察標(biāo)本時(shí),一般都先用10倍物鏡進(jìn)行觀察這樣便于尋找我們所要找的觀察像在找到所要的觀察物后,即將它移至視場中央,然后再轉(zhuǎn)換高倍物鏡進(jìn)行觀察。這時(shí)要適當(dāng)?shù)胤糯罂勺児怅@孔徑,以增加亮免同時(shí)通過微調(diào)以獲得*清晰的物象。

(7)在我們轉(zhuǎn)換物鏡時(shí),千萬不能用手扳動(dòng)物鏡進(jìn)行轉(zhuǎn)執(zhí)而是要用手抓住轉(zhuǎn)換沿的轉(zhuǎn)動(dòng)板進(jìn)行轉(zhuǎn)換,不池會(huì)使物鏡因受力而破壞與轉(zhuǎn)換器的配合關(guān)系,從而影響顯微鏡的成象質(zhì)量。有時(shí)轉(zhuǎn)換器的定位多少省一定的間隙誤差,這會(huì)使低倍物鏡轉(zhuǎn)換到高倍物鏡后,其中必有一定量的偏差,這時(shí)只要將轉(zhuǎn)動(dòng)板往復(fù)扳動(dòng)幾次即可消除。如果發(fā)現(xiàn)定位彈片彈性不好時(shí),則可拆下彈風(fēng)格彈片整整形,使其能緊壓轉(zhuǎn)動(dòng)板的定位榴上裝即可。必要時(shí)亦可以換一片折的定位彈片。
 

(8)所有的光學(xué)件部應(yīng)該保持消潔,因此我們拿取光學(xué)件材,千萬不能用手指接觸鏡片,也不允許有灰塵和口水吐沫飛濺在鏡片上。如果由于不慎鏡片被沾污時(shí),則應(yīng)及時(shí)用脫脂棉或白朗布蘸適量二甲苯輕輕地措拭干凈。

鏡頭有時(shí)由于保管不好會(huì)發(fā)霉起霧,尤其是我國南方各省氣候比較潮濕,更容易產(chǎn)生發(fā)霉起霧。這直接影響顯微鏡的成象質(zhì)顯甚至于會(huì)達(dá)到無法使用的程度。因此我們對顯微鏡的安置環(huán)境要特別重議,應(yīng)放置在干燥、清潔和無酸堿蒸氣的房間里,地面*好足疥石了地;墻和天花板均耍油漆,同時(shí)還要經(jīng)常打掃簡潔,從而消除灰塵的來源。

當(dāng)顯微鏡使用過后,應(yīng)及時(shí)將物鏡、目鏡取下,特別是油浸物鏡一定要及時(shí)用脫脂棉或白綢布蘸二甲苯將香柏油擦故干凈,不然待干固后就不好擦拭了。所有的鏡頭;在不用時(shí),均要放置在鏡頭盒中保護(hù)好;盆中放置有適量的吸潮劑一一變色硅膠(m510:?nH aO)它是透明或乳白色的顆粒,一般商品含水分約3—7%,嘆湖能力達(dá)40%左右,能耐鹽吱、硫酸、硝酸的浸潰。使用時(shí)籽砧膠縫在布袋里,由于硅膠的吸潮系利用表面活性物理作用,變色欣膠可按其顏色來判斷吸潮能力,當(dāng)硅膠由藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)榘咨珪r(shí),則表示它已失去吸潮作用,但可以持續(xù)吸潮能力的硅膠進(jìn)行加熱(170℃左右)烘餡處理后,仍然具行吸湖能力。所以,硅膠是可以反復(fù)應(yīng)用的。

另外近年來一機(jī)系統(tǒng)光學(xué)儀器三防小組研制了3207(H 50)防霉片,它是由殺菌劑對硝基苯醛添加適量粘結(jié)劑加工而成的。它在常溫下緩慢揮發(fā)出對硝基苯甲醛蒸氣殺死或抑制細(xì)茵,該藥品蒸氣不腐蝕金屬刀刃;不影響光學(xué)性能,而且是低毒品,在使用劑量內(nèi)對人體無害,但千萬不要用手接觸,而要用鑷子拿取,同時(shí)豎妥谷保管以防意外。每片防8片使用期可達(dá)10年之久,實(shí)為光學(xué)儀器的優(yōu)良防霉劑,值得推廣應(yīng)用。

由于該防蹲片是依賴揮發(fā)始?xì)鈿⒕?,所以防霉?好放置在密封或半密封的光路系統(tǒng)中。對于長期存放的光學(xué)軍部件,則可以放置在容器內(nèi)。對于計(jì)量或測試的光學(xué)儀器在艷修時(shí),也可以將防霉片放置在儀器的內(nèi)腔中。

以上是防霉防霧的一些措施,如果由于保管不善已經(jīng)產(chǎn)生發(fā)霉起霧時(shí)怎么辦,一般是用吹風(fēng)球吹去灰塵,或用毛筆輕輕地拭去附在鏡頭表而—l的灰塵,然后用脫脂棉或白綢布酷適量的二甲苯輕輕地擦拭,直至完全消除霧為止。使用者千萬不能用酒精或其他瓊類化合物來擦洗鏡知以免酒精滲入鏡片而引起鏡片脫膠。

同行的鏡頭在出廠前那是經(jīng)過嚴(yán)格的裝配和檢驗(yàn)的,因此使用者不得隨意把鏡頭訴開。必要時(shí),可及時(shí)送有關(guān)檢修單位進(jìn)行修理,不然拆壞鏡頭;那就不好辦了。

(9)對于顯微鏡的鏡架機(jī)械活動(dòng)部分應(yīng)有適量的潤滑脂,使其轉(zhuǎn)動(dòng)或滑移舒適。但有時(shí)由于日久使其潤滑脂硬化或灰塵積累,從而使機(jī)械活動(dòng)部分使用不靈活,這時(shí)對有潤滑脂部分零部件應(yīng)拆下進(jìn)行清洗,首先用汽油洗,然后用酒精和******的混合液進(jìn)行持拭,待千后涂上適量的潤滑脂,按原來的要求裝配起來。在拆卸時(shí)要特別注意各零部件之間的裝配關(guān)系和要求,不能硬敲強(qiáng)拆,在拆時(shí)*好畫出示意圖,明確裝配關(guān)系和定位拆下的零件要用盒子裝起來,以免遇久如沒有把握的話,*好送到專業(yè)修理部門去修,或者在專業(yè)的技術(shù)人員的指導(dǎo)下進(jìn)行拆裝才好。在上潤滑脂時(shí)千萬不能沾污在光學(xué)部件,以免引起清洗的麻煩。

(10)在使用中有時(shí)移動(dòng)尺的活動(dòng)卡失靈,這是由于胡笛與活動(dòng)卡上的定位孔脫離所致,有時(shí)感到活動(dòng)卡的彈性不大,這是由于扭黃經(jīng)長期使用而失去彈性所致。遇到這種情況時(shí),不管前者或后者,均需旋出螺釘,將扭簧的彎頭插入活動(dòng)卡的定位孔中,然后將有雙眼孔的胡簧在的定位孔對準(zhǔn)扭簧的另一端彎頭,緊接著將拉簧柱轉(zhuǎn)動(dòng)一定的角位,然后用螺釘與扭箕柱并緊,這樣既能解決移動(dòng)臺活動(dòng)卡的失靈問題。

(11)為調(diào)節(jié)光線的強(qiáng)弱,常常要轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡,有時(shí)會(huì)感到反光鏡的插朋配合過松,這是由于鏡架括閡的彈性槽合并所致,這時(shí)只要將槽板開一些就能得到較緊的配合。

(12)態(tài)使用中有時(shí)發(fā)現(xiàn)聚光鏡的可變光闌不圓整,這有幾種可能,一種是由于叫?片鉚訂掉了,另一種是由于濾色片下益的孔和轉(zhuǎn)動(dòng)園的福分布不勻稱所致。在這種情況下,只有根據(jù)產(chǎn)生的原因而更換零件才行。

(13)有時(shí)發(fā)覺鏡架發(fā)生變形甚至于有斷裂現(xiàn)象,這可能是由于運(yùn)輸或使用不慎鏡架受力撞擊所致。顯微鏡是比較精密的光學(xué)儀器一旦某一部分受撞擊而變形的話,那必然破壞儀器的使用性能,因此要求有關(guān)人員在運(yùn)輸或使用過程中需小心謹(jǐn)慎,如果已經(jīng)發(fā)生以上問題時(shí),那么只有制造單位修理部門更換零部件了。

以是敘述的內(nèi)容是生物顯微境在使用中常見的一些情況也是其他顯微鏡在使用時(shí)的一些常見問題,不盲目作為其他顯微鏡的使用與維護(hù)作參考。