尼康顯微鏡黃色激發(fā)塊Texas Red HYQ（帶通）

紫外可見和近紅外透射為尼康Texas Red HYQ高性能濾波器組合頻譜輪廓下面示于圖1.該濾波器組是一個兩尼康黃色激發(fā)組中，這兩者都采用的帶通發(fā)射（阻擋）濾波器而不是一個長通品種，以便限制從熒光團發(fā)射的量，組合優(yōu)化的波長區(qū)域以外的干擾。 在75納米發(fā)射窗（608至683納米）是結(jié)合了介質(zhì)寬度（55納米）激發(fā)通帶（532至587納米），以允許選擇性地激發(fā)和檢測特定熒光團受歡迎，這是在多個標記實驗常用的。 Texas Red HYQ濾波器組合配備有595納米（截止波長）長通二色鏡。

黃色激發(fā)濾光片座Texas Red HYQ規(guī)格：

• 激發(fā)波長篩選：532-587納米（帶通，560 CWL）

• 雙色鏡截止波長：595納米（長通，LP）

• 屏障過濾波長：608-683納米（帶通，645 CWL）

Texas Red HYQ濾波器組合被設計，以增加次級熒光的亮度，而不產(chǎn)生在信噪比的相應增加。 更陡的通帶是通過增加在兩個激發(fā)和發(fā)射濾光片干涉腔的數(shù)量，從而使頻譜輪廓之間的更接近創(chuàng)建。 所得更寬和更陡的濾波器通帶使該組，以提供更多的激發(fā)能量并捕獲熒光信號的更高的水平。 該過濾器組合與流行的熒光探針得克薩斯紅色和CY3.5進行了優(yōu)化，當單獨或多重標記技術(shù)被用于他們，并且也建議由黃色波長的激發(fā)熒光等應用。 帶通發(fā)射濾波器功能，以減少或消除從熒光團發(fā)射的深紅色或近紅外光譜區(qū)的干擾。 Texas Red HYQ濾波器組合被設計為尼康Y-2E / C組的較高的能量的變化，與更廣泛的激發(fā)和發(fā)射濾光器透射區(qū)域。它適合于用基本相同的組的探針的使用，同時提供對這些發(fā)光*出在Y-2E / C發(fā)射帶的上限改進的性能。(奧林巴斯顯微鏡)

因為由膨脹激發(fā)和發(fā)射通帶區(qū)域允許增加的能量傳輸，與Texas Red HYQ集合產(chǎn)生的圖像通常是亮的并顯得比那些從類似Y 2E / C組合更紅。 Texas Red HYQ，CY3.5，氨基放線菌素D（AAD），酸性品紅，Alexa Fluor 568和594，茜素絡合劑，BOBO-3，BO-PRO-3，BODIPY：學習以下熒光當Texas Red HYQ過濾器設置建議，ROX（羧基-X-羅丹明），DiBA**（5），HcRed，LDS 751（結(jié)合的RNA），MitoTracker紅，MRFP-1（單體紅色熒光蛋白），naphthofluorescein，SYPRO紅，SYTO 17（59,61， 64），YO-PRO-3，和YOYO-3。 在圖2中呈現(xiàn)的圖像表明具有多種針對不同細胞內(nèi)位置黃色吸收熒光探針的這種過濾器組合的性能。

示于圖2（a）是從大鼠袋鼠腎（PTK2線）的上皮細胞進行免疫熒光標記與初級抗波形蛋白（一種中間絲蛋白）的小鼠單克隆抗體的培養(yǎng)的熒光發(fā)射隨后的山羊抗小鼠Fab片段結(jié)合到羅丹明紅。 *大吸收羅丹明紅的是570納米，并且*大發(fā)射發(fā)生在590納米。 角蛋白是一類形成單絲，中間絲的一種類型，存在于細胞骨架結(jié)構(gòu)的水不溶性蛋白質(zhì)。 另外，將試樣同時染色用DAPI核DNA。 注意沒有來自藍色熒光團（DAPI），其不能有效地由黃色光激發(fā)信號的，但是從羅丹明標記波形蛋白中間纖維網(wǎng)的高水平的紅色熒光強度。

由薄小鼠腎臟的部分沾上多個（3）的熒光團的熒光發(fā)射強度顯示在圖2（b）。 在組織切片細胞核靶向與核酸探針的DAPI，當在細胞培養(yǎng)物和組織切片結(jié)合到DNA，其具有*大激發(fā)在358納米，并且具有發(fā)射*大值在461納米。 另外，低溫恒溫器部也同時沾上的Alexa Fluor 488麥胚凝集素（腎小球和曲小管）和Alexa Fluor 568鬼筆環(huán)肽（絲狀肌動蛋白和刷狀緣）。 注意沒有信號的同時從藍色（DAPI）和綠（的Alexa Fluor 488）探針，但強烈的紅色熒光由于的Alexa Fluor 568中的肌動蛋白和刷狀緣的網(wǎng)絡的存在。

印度麂的鹿皮沾上的Alexa Fluor 568綴合鬼筆環(huán)肽，其結(jié)合到細胞內(nèi)絲狀肌動蛋白網(wǎng)絡的成纖維細胞的培養(yǎng)，示于圖2的（c）。 *大吸收的Alexa Fluor 568的是578納米，并且*大發(fā)射發(fā)生在603納米的可見光譜的橙色區(qū)域。 另外，將試樣同時用DAPI染色（在細胞核靶向DNA;藍色發(fā)光）和MitoTracker綠FM（靶向線粒體;綠色發(fā)光）。 注意沒有信號從綠色（MitoTracker）和藍色（DAPI）的熒光團，它們是不能有效地激發(fā)在黃色的波長，但明亮的橙紅色熒光的肌動蛋白絲發(fā)揮。

圖2（D）展示了從HeLa細胞的培養(yǎng)即進行免疫熒光標記的同隨后綴合的Alexa Fluor 546的吸收*大值的Alexa的山羊抗-小鼠Fab片段初級抗組蛋白（鍋）的小鼠單克隆抗體的熒光發(fā)射強度氟546是556納米，并且*大發(fā)射發(fā)生在573納米（在可見光光譜的黃色區(qū)域）。 *抗體，從HeLa細胞的純化核級分生產(chǎn)，特異性結(jié)合的抗原決定簇，其存在于所有五個組蛋白（H1，H2A，H2B，H3和H4）。 注意從兩個間期核和單核前期強勁的紅色熒光強度。

大鼠胸主動脈（平滑?。┤旧募毎cMitoTracker紅CMXRos，其靶向細胞內(nèi)的線粒體的網(wǎng)絡，在圖2（e）是示出。 *大吸收MitoTracker紅CMXRos的是579納米，并且*大發(fā)射發(fā)生在599納米。 另外，將試樣同時用DAPI染色（在細胞核靶向DNA;藍色發(fā)光）和BODIPY FL-phallacidin（靶向肌動蛋白;綠色發(fā)光）。 注意沒有信號從藍色（DAPI）和綠（BODIPY）熒光團，但明亮的紅色熒光被管狀線粒體發(fā)揮。

由薄腳輪豆的部分自發(fā)熒光發(fā)射強度（ 蓖麻 ）組織表現(xiàn)出如圖2（f）所示。 在植物組織中的內(nèi)源性的自發(fā)熒光產(chǎn)生于各種生物分子，包括葉綠素，β-胡蘿卜素，葉黃素和。 在黃色激發(fā)區(qū)域，葉綠素具有吸收帶具有低消光系數(shù)，但仍然產(chǎn)生熒光的檢測水平在580納米的發(fā)射波長和上述（橙色和紅色）。 對于以上所說明的腳輪豆薄部分，注意自發(fā)熒光發(fā)射強度的在紅色光譜區(qū)的存在，但不存在強度中的低級（綠色和藍色）的波長。