顯微鏡的使用方法
光學(xué)顯微鏡
光學(xué)顯微鏡下,因?yàn)樗捎每梢姽鈾z測(cè)小的物體,可能是*知名的,并適當(dāng)運(yùn)用研究工具生物。然而,許多學(xué)生和老師都不知情的全方位的功能,在光學(xué)顯微鏡可用。由于其質(zhì)量和通用性的工具的成本增加,*好儀器,不幸的是,不能使用。對(duì)大多數(shù)學(xué)術(shù)課程。但是,即使是*便宜的“學(xué)生”顯微鏡能提供自然的壯麗景色,可以讓學(xué)生進(jìn)行一些合理的精密實(shí)驗(yàn)。
初學(xué)者往往認(rèn)為觀看小物件的挑戰(zhàn)在于獲得足夠的放大倍率。事實(shí)上,當(dāng)涉及到尋找生活的東西,*大的挑戰(zhàn)是,為了,
獲得足夠的對(duì)比
找到焦平面
獲得良好的分辨率
認(rèn)識(shí)到這個(gè)問題時(shí),人們看到它
這被認(rèn)為是生活在*小的物體是細(xì)菌。*小的細(xì)菌,可以觀察到與細(xì)胞的形狀確認(rèn)時(shí),僅僅放大100倍。他們是隱形明場(chǎng)顯微鏡,雖然。這些頁將描述用于獲得對(duì)比度類型的光學(xué)器件,用于查找標(biāo)本和專注于他們,并建議使用的測(cè)量設(shè)備用光學(xué)顯微鏡的建議。
顯微鏡的使用方法
光學(xué)顯微鏡類型
明視場(chǎng)顯微鏡是*有名的學(xué)生,是*有可能在教室里被發(fā)現(xiàn)。更好的裝備的教室和實(shí)驗(yàn)室有暗場(chǎng)和/或相襯光學(xué),微分干涉對(duì)比,諾馬斯基,霍夫曼調(diào)制對(duì)比和變化產(chǎn)生相當(dāng)大的深度分辨率和立體的,熒光和共焦顯微鏡是專門的儀器,用于研究,臨床和工業(yè)應(yīng)用。
以外的化合物的顯微鏡,于低放大倍數(shù)用更簡(jiǎn)單的儀器,也可以在實(shí)驗(yàn)室中發(fā)現(xiàn)的。立體顯微鏡或解剖顯微鏡通常有一個(gè)雙目鏡筒,長(zhǎng)工作距離,以及一系列的放大倍率通常從5倍到35或40倍。有些儀器供應(yīng)鏡頭放大倍率越高,但分辨率沒有提高。這種“虛假放大”是很不值得的代價(jià)。
顯微鏡的使用方法
明視場(chǎng)顯微鏡
與常規(guī)的明視場(chǎng)顯微鏡,光從白熾源通過一第二放大透鏡,眼或目鏡旨在朝向透鏡下方的載物臺(tái)稱為聚光鏡,通過樣品,通過一個(gè)物鏡,并且通過一對(duì)目鏡,再到人眼。我們看到在光路中的對(duì)象,因?yàn)樘烊簧鼗蛭蹪n吸收光的差異,或者是因?yàn)樗鼈兪亲銐蚝褚晕诊@著光量盡管是無色的。一個(gè)草履蟲應(yīng)顯示相當(dāng)不錯(cuò)的一個(gè)明視場(chǎng)顯微鏡,雖然它不會(huì)很容易地看到纖毛或大部分細(xì)胞器。活菌不會(huì)出現(xiàn),除非是觀眾打焦平面靠運(yùn)氣,并通過使用*大對(duì)比度失真的圖像。
良好的質(zhì)量顯微鏡具有一個(gè)內(nèi)置的照明器,可調(diào)節(jié)聚光用孔徑光闌(對(duì)比度)控制,機(jī)械的載物臺(tái),和雙目目鏡筒。聚光鏡用于通過在載物臺(tái)中的開口,以將光聚焦在樣品上。穿過樣品后,光被顯示給眼睛的表觀視場(chǎng)比照明的區(qū)域大得多。圖像的倍率是簡(jiǎn)單的物鏡放大倍數(shù)(通常印在鏡體)倍目鏡倍率。
學(xué)生通常知道使用的粗,細(xì)對(duì)焦旋鈕,用來增強(qiáng)標(biāo)本的形象。它們常常不知道調(diào)整會(huì)影響分辨率和對(duì)比度的聚光鏡。一些聚光鏡被固定在適當(dāng)?shù)奈恢?,其它的是可聚焦,使得光的質(zhì)量可以調(diào)節(jié)。通常對(duì)于一個(gè)聚焦的聚光鏡的*佳位置是盡量靠近載物臺(tái)的可能。明場(chǎng)聚光鏡通常包含孔徑光圈,一個(gè)控制所述光束上來通過聚光鏡的直徑,使得當(dāng)隔膜被停止下來(幾乎封閉)的光穿過聚光透鏡的中心來直線上升裝置和對(duì)比度高。當(dāng)隔膜是敞開的圖像更明亮,對(duì)比度低。
不必僅僅依靠孔徑光闌對(duì)比度的缺點(diǎn)是,*過*佳點(diǎn)更多的對(duì)比你生產(chǎn)的越多,扭曲的形象。具有體積小,未染色,未染色的標(biāo)本,你通常都是過去的*佳對(duì)比度,當(dāng)你開始看到的圖像。
顯微鏡的使用方法
使用明場(chǎng)顯微鏡
首先,想想你想要做顯微鏡什么。什么是你需要的*大放大倍率?你在看一個(gè)染色標(biāo)本?多少對(duì)比度/分辨率,你需要?接下來,開始設(shè)置進(jìn)行查看。
安裝樣品在載物臺(tái)上
蓋玻片必須啟動(dòng),如果有一個(gè)。高倍物鏡無法通過厚厚的玻璃載玻片重點(diǎn); 它們必須被帶到靠近樣品,這就是為什么蓋玻片是如此之薄。該載物臺(tái)可配備有簡(jiǎn)單的夾子(不太昂貴的顯微鏡),或者用某種類型的滑動(dòng)架的。滑動(dòng)可能需要手動(dòng)定位,或有可能是一個(gè)機(jī)械的載物臺(tái)(優(yōu)選),允許精確定位而不觸及載玻片。
顯微鏡的使用方法
優(yōu)化照明
光源應(yīng)具有一個(gè)寬的動(dòng)態(tài)范圍,以提供高強(qiáng)度的照明,在高放大倍率和較低的強(qiáng)度,使得用戶可以以低倍率查看舒服。更好顯微鏡具有一個(gè)內(nèi)置的照明器,并且*好顯微鏡具有*過光強(qiáng)度和光束形狀的控制。如果您的顯微鏡需要外部光源中,確保光旨在向聚光鏡的中部。調(diào)整照明,使該領(lǐng)域是光明的,不傷眼睛。
調(diào)節(jié)聚光鏡
調(diào)整和對(duì)準(zhǔn)顯微鏡,通過閱讀說明書開始。如果沒有手動(dòng)可用,請(qǐng)嘗試使用這些準(zhǔn)則。如果聚光鏡是可聚焦,用鏡頭盡量靠近開口的載物臺(tái),你可以把它放置它。如果聚光鏡具有可選擇的選項(xiàng),將其設(shè)置為亮場(chǎng)。先從光圈停了下來(高對(duì)比度)。你應(yīng)該看到,當(dāng)您移動(dòng)孔徑光闌桿,來了通過樣品改變亮度的光。
想想你在找什么
這是一個(gè)很大很難找到的東西時(shí),你有沒有期望,它的美觀。它有多大?將它移動(dòng)?它是色素或染色,如果是這樣是什么顏色?你在哪里期望找到它在載玻片?例如,學(xué)生通常有很多的麻煩找染細(xì)菌,因?yàn)橛萌庋酆偷捅堵实臇|西,看起來像污垢。它有助于知道,因?yàn)橥科傻顾麄兺ǔ?huì)留下戒指,這樣一抹黑的邊緣通常具有細(xì)胞*密集的濃度。
顯微鏡的使用方法
重點(diǎn),定位和中心樣品
在上樣品和/或要進(jìn)行檢查的檢體的一部分開始與*低倍率物鏡,到家庭。這是相當(dāng)容易找到并專注于組織部分,特別是如果他們是固定的,染色,與大多數(shù)準(zhǔn)備載玻片。然而,它可以是非常難以定位活,分鐘標(biāo)本,如細(xì)菌或不著色的原生生物。酵母細(xì)胞的懸浮液,使一個(gè)很好的做法標(biāo)本很難找到對(duì)象。
使用暗場(chǎng)模式(如果可用)來查找未染色標(biāo)本。如果沒有,開始具有高對(duì)比度(孔徑光闌倒閉)。
開始與樣品失焦,使載物臺(tái)和物鏡,必須緊密聯(lián)系起來所帶來的。*面來成為關(guān)注的焦點(diǎn),你把載物臺(tái)和物鏡在一起蓋玻片的頂部。隨著涂片,蓋玻片經(jīng)常不使用,讓你看到的*件事就是涂抹本身。
如果您有問題,著眼于蓋玻片或氣泡,或東西,你可以很容易地識(shí)別的邊緣。蓋玻片的頂邊進(jìn)入焦點(diǎn)首先,再下方,這應(yīng)該是在相同的平面內(nèi)的檢體。
一旦你找到標(biāo)本,調(diào)整對(duì)比度光照和強(qiáng)度,直到你有一個(gè)好地方觀看四處移動(dòng)的載玻片。
調(diào)整目鏡分離,焦點(diǎn)
與單一的眼,沒有什么做的目鏡,除了保持干凈。用雙目顯微鏡(*),你只需要像你做一個(gè)雙筒望遠(yuǎn)鏡,調(diào)整目鏡分離。雙眼單視功能是更敏感的光線和細(xì)節(jié)比單眼視力,所以如果你有一個(gè)雙目顯微鏡,利用它的優(yōu)勢(shì)。
的一個(gè)或兩個(gè)目鏡可以是伸縮目鏡,即,可以重點(diǎn)它。由于很少有人有眼睛的**匹配,我們*需要關(guān)注一只目鏡來匹配其他圖像。期待與適當(dāng)?shù)难鄄砍晒潭跨R和重點(diǎn)用顯微鏡調(diào)焦旋鈕。接下來,看看可調(diào)目鏡(當(dāng)然,另一只眼睛),并調(diào)整目鏡,而不是顯微鏡。
選擇一個(gè)物鏡,用于觀看
*低倍率透鏡通常為3.5或4倍,并主要用于*初發(fā)現(xiàn)標(biāo)本。我們有時(shí)稱它為因?yàn)檫@個(gè)原因掃描鏡頭。*經(jīng)常使用的物鏡是10倍透鏡,它給出了100倍的*終放大倍數(shù)用10倍目鏡。對(duì)于非常小的單細(xì)胞生物,并在準(zhǔn)備載玻片的細(xì)節(jié),如細(xì)胞器或核分裂象,則需要更高的放大倍率。典型的高倍率鏡頭是40倍和97x和100倍。后者兩個(gè)倍數(shù),專門用于與油,以提高分辨率。
上移的放大率的步驟。每次你去到一個(gè)更高的倍率物鏡,重新聚焦和重新中心的標(biāo)本。更高的放大倍率的透鏡必須在物理上更接近樣品本身,這對(duì)干擾物鏡入樣品的風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)焦時(shí)非常謹(jǐn)慎。順便說一下,透鏡質(zhì)量好集是齊焦,即,當(dāng)切換放大率檢體保持在焦點(diǎn)或接近聚焦。
更大并不總是更好。所有樣品具有三個(gè)維度,除非檢體極薄將無法集中具有高放大倍數(shù)的物鏡。在放大倍率越高,越難“追”移動(dòng)標(biāo)本。
顯微鏡的使用方法
調(diào)整照明為選定物鏡
目鏡的視場(chǎng)是恒定的,無論使用的放大倍率。因此可以得出,當(dāng)你提高放大倍數(shù),你看到照亮樣品的面積較小。既然你正在尋找一個(gè)更小的面積,更少的光到達(dá)眼睛,和圖像變暗。具有低功耗的物鏡,你可能不得不減少光照強(qiáng)度。具有高倍率,你需要所有的光,你可以得到的,尤其是較便宜的顯微鏡。
當(dāng)使用明視場(chǎng)顯微鏡
明視場(chǎng)顯微鏡*適合觀看的彩色或天然著色標(biāo)本,如組織切片染色制備載玻片或活光合生物。它是無用的活細(xì)菌的標(biāo)本,以及低劣用于非光合原生生物或后生動(dòng)物,或者未染色細(xì)胞懸浮液或組織切片。下面是標(biāo)本,可能使用明視場(chǎng)顯微鏡觀察,并適當(dāng)放大倍率一個(gè)不那么完整列表(**終放大倍數(shù)是強(qiáng)調(diào))。
準(zhǔn)備載玻片,染色 - 菌(1000倍),厚的組織切片(100X,400X),*薄切片冷凝染色體或特殊染色細(xì)胞器(1000倍),大原生生物或后生動(dòng)物(100X)。
涂片,染色 - 血液(400倍,1000倍),負(fù)染細(xì)菌(400X,1000X)。
生活制劑(濕,未染色) - 池塘水(40倍,100倍,400倍),原生生物或后生動(dòng)物(40X,100X,400X偶爾),藻類等微小植物材料(40X,100X,400X)。較小的樣本將很難不變形觀測(cè),特別是如果他們沒有色素沉著。
顯微鏡的護(hù)理
一切在一個(gè)良好的質(zhì)量顯微鏡是令人**的昂貴,所以要小心。
持有顯微鏡堅(jiān)決的立場(chǎng),只有。從未抓住它由目鏡支架,例如。
拔下照明燈時(shí)握住插頭(而不是電纜)。
由于燈泡價(jià)格昂貴,且有有限的生命,當(dāng)您完成,關(guān)閉照明燈。
始終確保載物臺(tái)和鏡頭都收拾顯微鏡前清潔。
不要使用紙巾去擦拭,用無塵布,甚至比質(zhì)量好的鏡頭紙或棉簽其他任何材料(必須是100%天然棉)清潔光學(xué)表面。要溫柔!您可以使用適當(dāng)?shù)溺R頭清潔劑或蒸餾水,以幫助去除干燥的物料。有機(jī)溶劑可以單獨(dú)或損壞透鏡元件或涂層。
在不使用時(shí)的儀器蓋上防塵套。
順利焦點(diǎn); 不要試圖加速通過聚焦進(jìn)程或強(qiáng)求什么。例如,如果你遇到對(duì)焦時(shí),那么你可能已經(jīng)達(dá)到了一個(gè)極限,還在繼續(xù)聚焦,這是錯(cuò)誤的方向。
顯微鏡的使用方法
下面是關(guān)于如何使用和調(diào)整的復(fù)合顯微鏡的使用方法一步一步的指示:
1 打開照明燈。使用調(diào)光器時(shí),*好是慢慢地增加燈泡的光強(qiáng)度相當(dāng)快地加熱。
2 將載物臺(tái)上的切片或樣品與樣品直接在上面光圈,如果可能的話,把它固定在載物臺(tái)夾片器。 提醒:蓋玻片總是需要讓*優(yōu)質(zhì)的圖像。
3 確保光圈是完全開放的,允許的*大光量達(dá)到滑動(dòng)鏡片。 注意:不要使用可變光圈控制光線,它是分辨率和對(duì)比度控制-調(diào)光器,而不是使用。
4 旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器,使物鏡倍率的*低水平,直接在上面的樣品。 提醒:使用低倍率的物鏡,幫助來選擇感興趣的部分標(biāo)本,然后進(jìn)一步調(diào)整。
5 通過雙目目鏡,直到調(diào)整可變光闌的光量是令人滿意的。更多的光線比光線越少,但觀眾的眼睛的舒適度,也應(yīng)考慮。
6 轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)旋鈕,直到樣品成為廣泛關(guān)注的焦點(diǎn)。 注意:為了避免物鏡和切片接觸,不應(yīng)該使用粗聚焦和高放大倍率的物鏡。
7 轉(zhuǎn)動(dòng)微調(diào)旋鈕,直到標(biāo)本都成為大家關(guān)注的焦點(diǎn)。 注意:不應(yīng)該需要很長(zhǎng)的時(shí)間來尋找焦點(diǎn),否則也可以使高倍率物鏡接觸切片,損傷物鏡。如果你有困難的時(shí)候,先用低倍率找到焦點(diǎn),然后輕微轉(zhuǎn)動(dòng)微調(diào)旋鈕。
8 然后,觀眾應(yīng)該能夠旋轉(zhuǎn)物鏡更高的設(shè)置,將樣品放入少量的重新定位的越來越多的細(xì)節(jié)。
顯微鏡的使用方法
一些復(fù)合顯微鏡來什么叫做架停止。一個(gè)機(jī)架站防止被降低到切片的物鏡。
然而,一些較舊的顯微鏡不有架停止,所以它始終是明智的檢查,以防萬一。降低物鏡成切片,可以很容易地打破了切片和損壞樣品。
為了安全地將您的顯微鏡,一方面應(yīng)根據(jù)其基本的支持和在其手臂。請(qǐng)務(wù)必只關(guān)掉顯微鏡調(diào)光器設(shè)定的*低強(qiáng)度時(shí),總是關(guān)閉燈泡移動(dòng)顯微鏡前。
所以,現(xiàn)在你知道如何使用和調(diào)整復(fù)合顯微鏡。干得好。可視快樂!