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奧林巴斯顯微鏡:暗視野顯微鏡故障排除

2020-09-04 09:30:35

有許多相關(guān)的常見(jiàn)問(wèn)題與暗視野顯微鏡和顯微攝影或數(shù)字成像。 這些范圍從使用不正確的大小視場(chǎng)光闌足夠的照明和聚光鏡失準(zhǔn)。 暗場(chǎng)照明問(wèn)題都與臺(tái)下聚光器,這應(yīng)該是第一個(gè)問(wèn)題,當(dāng)事情不正常工作。 成像標(biāo)本時(shí)使用這種技術(shù),下面的問(wèn)題和解決辦法應(yīng)作為一個(gè)指南。



問(wèn)題: 
有足夠的照明,使樣本可見(jiàn),,或試樣是可見(jiàn)的,但非常微弱的。


解決方案 :燈電壓可設(shè)置得太低,或燈泡可能沒(méi)有足夠的強(qiáng)度,以適當(dāng)?shù)卣樟猎嚇印?nbsp;最多約12伏的電壓升高(為12伏,100瓦鎢鹵素?zé)襞荩┗蚋鼡Q光源,如果可能的話,與一個(gè)更大的強(qiáng)度。 如果不解決這個(gè)問(wèn)題,檢查臺(tái)下聚光器,以確保其適當(dāng)?shù)拇笮∨c視場(chǎng)光闌的正確定位。 另外,檢查的顏色和/或中性密度濾光片,偏光片,相位差板,或任何其他組件,可能減少照明強(qiáng)度的光路徑。 

如果這個(gè)問(wèn)題出現(xiàn)高數(shù)值孔徑反映聚光鏡,檢查聚光鏡頂級(jí)鏡頭是正確的顯微鏡幻燈片底部的油。 如果浸沒(méi)接觸已被打破,重新把聚光鏡油和架起來(lái),直到頂端透鏡完全浸在油中,并在與底部的滑動(dòng)接觸。




問(wèn)題: 
視野有一個(gè)黑點(diǎn)在中心,減少光照強(qiáng)度,但在外圍的對(duì)象是良好的照明和顯示正常。


解決方案 :要么是不正確的位置臺(tái)下聚光器或光站的物鏡是錯(cuò)誤的大小。 小心地機(jī)架物鏡向上和向下,同時(shí)觀察在視野標(biāo)本。 進(jìn)行檢查,以一定的,兩個(gè)聚光鏡光圈和視場(chǎng)光闌被設(shè)置為敞開(kāi)位置。 如果這并不影響照明,使它稍大或稍小的改變視場(chǎng)光闌的大小,然后重新檢查照明。 

有時(shí)候,這個(gè)問(wèn)題產(chǎn)生,當(dāng)顯微鏡載玻片過(guò)厚(更大的比標(biāo)準(zhǔn)1毫米的)。 使用千分尺或一組表卡尺來(lái)確定的厚度的滑動(dòng)和滑動(dòng)/蓋玻片組合。 如果滑動(dòng)過(guò)厚時(shí),要么改變正確的厚度的滑動(dòng)或者“檢查聚光鏡,以確定它是否可以進(jìn)行調(diào)整,以補(bǔ)償不同厚度的幻燈片。




問(wèn)題: 
燈往往有一個(gè)很短的壽命,并與黑色蒸發(fā)鎢涂層的燈泡內(nèi)部的燒結(jié)。


解決方案 :在過(guò)高的電壓很長(zhǎng)時(shí)間,這肯定會(huì)減少壽命的燈泡已使用。更換燈泡和燈電壓降低后觀察和/或試樣的顯微攝影。




問(wèn)題: 
圖像具有的明視野周邊帶或不帶在中心的暗區(qū)。


解決方案 :這個(gè)問(wèn)題是典型時(shí),臺(tái)下聚光器錯(cuò)誤地居中或視場(chǎng)光闌是太小了。 恢復(fù)到明視場(chǎng),并重新建立的科勒照明條件,然后重復(fù)暗場(chǎng)過(guò)程中,確保聚光鏡的中心。 如果這沒(méi)有幫助,增加視場(chǎng)光闌的大小,直到適當(dāng)?shù)陌祱?chǎng)條件成立。 

這個(gè)問(wèn)題也可能出現(xiàn)時(shí)使用的物鏡,過(guò)高的暗場(chǎng)聚光鏡的數(shù)值孔徑。 如果在物鏡內(nèi)部有一個(gè)可變光闌,降低光圈孔徑的大小來(lái)確定,如果太多的斜光進(jìn)入的物鏡前透鏡。 此外,它可能有助于提高到一個(gè)更高的數(shù)值孔徑反射的暗場(chǎng)聚光鏡的視場(chǎng)光闌的大小或更改。




問(wèn)題: 
僅在一側(cè)的外圍的視野是光明的。


解決方案 :檢查物鏡轉(zhuǎn)換器,以確保物鏡被正確地定位在光軸的顯微鏡。 有一個(gè)定位的物鏡是適當(dāng)?shù)奈恢脮r(shí)停止,將產(chǎn)生一個(gè)正的“啪嗒”。 如果不正確的中心視場(chǎng)光闌,也可能會(huì)出現(xiàn)的問(wèn)題。 取下目鏡,并把相望遠(yuǎn)鏡的眼睛管(或使用伯特蘭透鏡),然后使用中心的螺絲以正確對(duì)齊視場(chǎng)光闌。



問(wèn)題: 
圖片的標(biāo)本不明確,缺乏足夠的對(duì)比度和細(xì)節(jié)。


解決方案 :暗視野顯微鏡的樣本可能不適合。 許多染色標(biāo)本不分散足夠的光線暗場(chǎng)條件下可以清楚地成像。 試樣的厚度,也可能是一個(gè)問(wèn)題,因?yàn)榉浅1〉臉悠吠怀上褚约皬陌狄曇?/span>聚光鏡發(fā)射與傾斜光線。 切換到明場(chǎng),相襯,DIC,霍夫曼調(diào)制對(duì)比度,以確定這是否提高了標(biāo)本的對(duì)比。




問(wèn)題: 
明亮的區(qū)域,重點(diǎn)阻撓的暗場(chǎng)標(biāo)本的觀察和/或顯微攝影。


解決方案 :這可能是由于灰塵,頭發(fā),纖維,和/或聚光鏡上方某處的光學(xué)表面的臟物污染。 徹底清潔標(biāo)本的光學(xué)級(jí)組織或棉花。 有時(shí)候,這個(gè)問(wèn)題的產(chǎn)生是由于在物鏡前透鏡的污染。 小心地松開(kāi)物鏡,其所在地的消防水***,慢慢地打開(kāi),而通過(guò)目鏡觀察樣品。 如果阻塞隨著旋轉(zhuǎn)的物鏡,那么它可能是由于灰塵上的前透鏡。 刪除的物鏡和滋潤(rùn)鏡頭前輕輕地呼氣,然后再用鏡頭紙或棉簽包裹的長(zhǎng)木桿。 更換的物鏡和檢查,以一定的阻礙已被完全刪除。




問(wèn)題: 
均勻地照亮的背景,但不是全黑或出現(xiàn)灰色的顏色。


解決方法 :這個(gè)問(wèn)題通常發(fā)生在不透明的場(chǎng)站為物鏡太小。 取出的目鏡和查看的后焦平面上的一個(gè)光路中的樣本的情況下,無(wú)論是用相位望遠(yuǎn)鏡或伯特蘭透鏡的物鏡。 整個(gè)背部焦平面應(yīng)該是黑暗的,沒(méi)有任何邊緣明亮的光線出現(xiàn)在周?chē)?nbsp;如果觀察到的光的弧或圓中的物鏡的后焦平面上,改變到一個(gè)稍大的視場(chǎng)光闌。 此外,降低視場(chǎng)光闌的大小,將有助于在抑制眩光和一個(gè)烏黑背景,(注意不要關(guān)閉虹膜光圈太多)。



問(wèn)題: 
聚光鏡的圖像部分地填充視野,遮蔽試樣的細(xì)節(jié)。


解決方案 :可調(diào)節(jié)的滑動(dòng)可能太薄或聚光鏡的太高。 測(cè)量厚度的顯微鏡幻燈片進(jìn)行檢查,以確定油接觸不破。 如果遇到困難,保持底部的幻燈片油,請(qǐng)嘗試使用較厚的幻燈片。




問(wèn)題: 
顏色出現(xiàn)在背景中,或用灰鑄鐵的背景光線不均。


解決方法 :這個(gè)問(wèn)題經(jīng)常發(fā)生在整個(gè)很厚的坐騎,或過(guò)多時(shí),散射光污染工件的安裝介質(zhì)中捕獲。 倒閉的視場(chǎng)光闌和旋轉(zhuǎn)標(biāo)本,以找到最好的方向,然后確定問(wèn)題是否已得到糾正。 試樣可以被重新安裝在較薄的裝載或安裝介質(zhì),可能需要進(jìn)行過(guò)濾。 用柔軟的鏡頭紙或棉簽小心地清潔整個(gè)的顯微鏡載玻片和蓋玻片。




問(wèn)題: 
查看水生生物的在水性安裝,標(biāo)本漂在一個(gè)單一的方向不斷,難以觀察和顯微攝影。


解決方案 :對(duì)流電流正在創(chuàng)建在蓋玻片的邊緣由于緩慢蒸發(fā)。 放置的胎圈,凡士林或Cytoseal安裝牢固地密封到顯微鏡載玻片上的周?chē)橘|(zhì)的外周的蓋玻片。 商業(yè)產(chǎn)品是可用的,可以被加入到水中,以減緩這些微小的生物體的運(yùn)動(dòng),使得它們更容易拍攝。




問(wèn)題: 
當(dāng)觀看試樣通過(guò)10x物鏡,有一個(gè)長(zhǎng)橢圓形的光點(diǎn)的中心的視野。


解決方案 :聚光鏡可能被錯(cuò)誤地聚焦或擴(kuò)散過(guò)濾器可能會(huì)丟失,導(dǎo)致的圖像出現(xiàn)在視野的燈絲。 重新聚焦在聚光鏡和作出若干光路中的過(guò)濾器是一種擴(kuò)散。




問(wèn)題: 
視野有亮點(diǎn),有問(wèn)題的樣本與實(shí)現(xiàn)大家關(guān)注的焦點(diǎn)。


解決方案 :小氣泡可能被困在聚光鏡的頂部和底部的顯微鏡載玻片之間的油。 取出的目鏡(或插入伯川德透鏡)觀察的后焦平面上的物鏡,其中的氣泡將是可見(jiàn)的。 為了彌補(bǔ),打破油接觸,并用棉簽除去殘留的氣泡。清潔聚光鏡的前鏡頭與顯微鏡玻片上多余的油,然后申請(qǐng)一個(gè)干凈的滴油的鏡頭。 如果問(wèn)題仍然存在,徹底清潔所有的光學(xué)表面,然后再重新將油。




問(wèn)題: 
在高放大倍率,膠體粒子顯示不完整的牛頓環(huán),并出現(xiàn)不均勻的照明。


解決方案 :聚光鏡可能是偏離中心。 切換到低功耗的物鏡和中心聚光鏡。 仔細(xì)檢查,以確定更高的功率物鏡是否具有不同的中心,及若有,顯微鏡光軸中心的物鏡