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尼康顯微鏡:熒光激發(fā)塊的分類
落射熒光的干擾和吸收濾色鏡組合被安置在濾色鏡立方體(或光學(xué)塊),并包括激發(fā)濾光片,二色性分束器(通常稱為反光鏡),和光柵(或發(fā)射)的濾色鏡,如在圖1中示出(一)。使用本指南中選擇適當(dāng)?shù)臑V色鏡設(shè)置為廣角熒光顯微鏡調(diào)查所用的發(fā)色團(tuán)的激發(fā)和發(fā)射光譜特性相匹配。作為一個(gè)例子,圖1(b)給出一個(gè)典型的高性能帶通發(fā)射藍(lán)光激發(fā)濾色鏡組合的光譜。尼康熒光濾光器組合中所提供窄,中,寬的通帶激發(fā)版本與相應(yīng)的發(fā)射濾色鏡
2020-09-04
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尼康顯微鏡:電動(dòng)顯微鏡的結(jié)構(gòu)
電動(dòng)顯微鏡部件及配件啟用研究者活細(xì)胞圖像采集自動(dòng)化,范圍從毫秒到幾十或數(shù)百分鐘的時(shí)間刻度間隔時(shí)間推移實(shí)驗(yàn)是特別有用的??梢约友b各種各樣的售后輔助部件,如機(jī)電遮光器,電動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)盤,微處理器控制的濾波器切換(濾光輪),電動(dòng)載物臺(tái),和軸向聚焦控制機(jī)制的研究級(jí)顯微鏡和交互控制由一個(gè)同伴工作站計(jì)算機(jī)使用市售圖像采集軟件包。然而,應(yīng)該注意的是,組裝一個(gè)完全自動(dòng)化的和優(yōu)化的多維光學(xué)成像系統(tǒng)是一個(gè)非常復(fù)雜的任務(wù)。
2020-09-04
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尼康顯微鏡:熒光顯微鏡的結(jié)構(gòu)
由有機(jī)和無機(jī)樣品的光的吸收,隨后再輻射通常是既定的物理現(xiàn)象作為熒光或磷光的結(jié)果。通過光的發(fā)射熒光過程幾乎是同時(shí)地吸收的激發(fā)光的光子的吸收和發(fā)射,取值范圍通常小于一微秒的持續(xù)時(shí)間相對(duì)較短的時(shí)間之間的延遲。當(dāng)發(fā)射仍然存在更長(zhǎng)的時(shí)間后已經(jīng)熄滅的激發(fā)光,該現(xiàn)象被稱為磷光。首先描述英國(guó)科學(xué)家喬治爵士G.斯托克斯于1852年,是負(fù)責(zé)這一術(shù)語時(shí),他觀察到的礦物螢石發(fā)出紅光,當(dāng)它被照亮的紫外線激發(fā)熒光。斯托克斯指
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡:熒光激發(fā)和發(fā)射基本面概述
由于其新穎的電子配置,熒光染料有獨(dú)特的特征吸收光譜(通常是類似的激發(fā))和發(fā)射。這些吸收光譜和發(fā)射光譜表明相對(duì)強(qiáng)度的熒光,與經(jīng)典的相對(duì)強(qiáng)度與波長(zhǎng)在橫軸上繪制在垂直軸。對(duì)于一個(gè)給定的熒光染料,制造商指示的照明激發(fā)光強(qiáng)度和熒光的發(fā)光強(qiáng)度的峰值波長(zhǎng)為峰值波長(zhǎng)。重要的是要了解顯示對(duì)于一個(gè)給定的熒光染料的激發(fā)和發(fā)射光譜的圖表和曲線的原點(diǎn)。為了確定一個(gè)特定的熒光染料的最大吸收波長(zhǎng)(通常是相同的激發(fā)最大值)的發(fā)射
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡:萊因伯格照明系統(tǒng)的介紹
光學(xué)染色的一種形式,萊因伯格照明(Rheinberg Illumination),最初是展示皇家顯微學(xué)會(huì)和Quekett的俱樂部(英格蘭)在一百多年前由英國(guó)顯微鏡朱利葉斯萊因伯格。這種技術(shù)是一個(gè)顯著的變化,從低到中等功率暗場(chǎng)照明使用彩色明膠或玻璃過濾器提供豐富的標(biāo)本和背景顏色??梢缘娜R因伯格技術(shù)相比更熟悉的暗場(chǎng)照明。在暗視野顯微鏡,臺(tái)下聚光器配置,使來自燈的光的光線,通過聚光鏡,將試樣通過只在很斜
2020-09-04
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徠卡顯微鏡:立體顯微鏡TripleBeam技術(shù)
特別是在熒光顯微鏡,激發(fā)光是在一個(gè)朋友和敵人。一方面,通過一個(gè)特定的光的波長(zhǎng)的熒光染料,從而在明亮的陽性熒光染料信號(hào)富含能量的激發(fā)是非常值得歡迎的。另一方面,“噪音”的通過引起的反射的激發(fā)光通過的光學(xué)元件的表面需要是極其微小的,以產(chǎn)生一個(gè)完美的黑色背景。這種關(guān)系描述為“信號(hào) - 噪聲比”,這是高度相關(guān)的差分光學(xué)熒光陽性和陰性細(xì)胞之間。 獨(dú)立的熒光照明燈的光束路徑這個(gè)系統(tǒng)的關(guān)鍵是,更多的激發(fā)光(能量
2020-09-04
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尼康顯微鏡:熒光蛋白的成像參數(shù)
迄今發(fā)現(xiàn)的熒光蛋白及衍生工具的廣泛用途相當(dāng)廣泛,并已成功地應(yīng)用在幾乎每一個(gè)生物學(xué)科從微生物系統(tǒng)生理學(xué)。這些獨(dú)特的探頭已經(jīng)證明是非常有用的記者在培養(yǎng)細(xì)胞和整個(gè)動(dòng)物的基因表達(dá)研究。熒光蛋白在活細(xì)胞中,最常用的跟蹤本地化和動(dòng)態(tài)的蛋白質(zhì),細(xì)胞器,和其他細(xì)胞區(qū)室,以及細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)運(yùn)輸示蹤劑。很容易地完成了多種技術(shù),其中包括寬視場(chǎng),共聚焦和多光子顯微鏡,熒光蛋白的定量成像曝光細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的復(fù)雜性,提供了一個(gè)
2020-09-04
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尼康顯微鏡:在光學(xué)顯微鏡標(biāo)本的對(duì)比
生物體和類似的透明,未染色標(biāo)本的高分辨率光學(xué)顯微鏡通常遭受缺乏對(duì)比,使這些標(biāo)本幾乎看不見明照明模式。使用的顯微鏡物鏡的全孔徑,未染色的標(biāo)本的圖像是非常差的,即使是透明的周期性結(jié)構(gòu)的衍射光柵,對(duì)齊的纖維,集成電路副本,如絲狀藻類,硅藻。 雖然透明標(biāo)本通常相互作用的光散射和衍射光束通過誘導(dǎo)相移,這些對(duì)象仍然在顯微鏡看不見的,因?yàn)槿说难劬o法檢測(cè)到不同的階段。樣本,除非是高度著色的染料染色,可為顯微鏡,
2020-09-04