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尼康顯微鏡:在光學(xué)顯微鏡的衍射障礙
光學(xué)顯微鏡發(fā)揮了核心作用,幫助理清復(fù)雜的生物學(xué)奧秘自從十七世紀(jì)荷蘭發(fā)明家安東尼凡列文虎克,英國(guó)科學(xué)家羅伯特·胡克首先報(bào)道分別使用單鏡頭及復(fù)合顯微鏡,觀察。在過去的三個(gè)世紀(jì)中,廣大的技術(shù)開發(fā)和制造的突破導(dǎo)致了顯著的先進(jìn)的顯微鏡設(shè)計(jì),極大地提高了圖像質(zhì)量,以最小的像差。然而,盡管計(jì)算機(jī)輔助光學(xué)設(shè)計(jì)和自動(dòng)化磨削方法用來制造現(xiàn)代的鏡頭組件,基于玻璃顯微鏡仍然阻礙征收可見光的波陣面的衍射光學(xué)分辨率極限,因?yàn)?
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡:物鏡的數(shù)值孔徑和分辨率
顯微鏡物鏡的數(shù)值孔徑是其收集光并解決細(xì)標(biāo)本細(xì)節(jié)在一個(gè)固定的物體距離的能力的量度。圖象形成光波穿過試樣和在倒置錐體進(jìn)入物鏡,如圖1這個(gè)錐形光的縱向切片顯示了孔徑角,是由物鏡的焦距確定的值。角μ是二分之一的數(shù)值孔徑角(A),它與通過以下等式的數(shù)值孔徑:數(shù)值孔徑 (NA) = n(sin μ)其中n是物鏡的前透鏡和試樣玻璃蓋,一個(gè)值,該范圍為1.00空氣1.51專門浸沒油之間的成像介質(zhì)的折射率。許多作者
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡的熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)
初級(jí)概念特定分子種類之間的相互作用的活細(xì)胞中的精確位置和性質(zhì)是在生物學(xué)研究的許多領(lǐng)域主要關(guān)心的,但是調(diào)查經(jīng)常被用來研究這些現(xiàn)象的文書的分辨率有限的阻礙。 常規(guī)寬視場(chǎng)熒光顯微鏡使在由瑞利判據(jù),約200納米(0.2微米)所定義的光空間分辨率極限本地化熒光標(biāo)記的分子。 然而,為了理解所涉及的典型的生物分子的過程蛋白伙伴之間的物理相互作用,分子的相對(duì)接近度,必須更精確地確定比衍射限制的
2020-09-04
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人眼能分辨的東西有多大?
人眼能分辨的東西有多大??? 對(duì)于人眼的分辨極限也必須滿足瑞利判據(jù): ? ? ? ? ? ? ? ? △Q=1.22λDD---人眼的瞳孔直徑(2mm~9mm,取中間值5mm);λ---波長(zhǎng),人眼最敏感的綠光約為5500nm△Q---人眼的視角(約為1')最小分辨距離△y=25△Q≈0.1mm(人眼的明視距離約為25cm)??當(dāng)人眼看不清楚的,需要用顯微鏡觀察,該如何選擇顯微鏡,我們要看(研究)
2020-09-04
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尼康顯微鏡:活細(xì)胞成像對(duì)光學(xué)系統(tǒng)和CCD的要求
在活細(xì)胞研究設(shè)計(jì)的光學(xué)顯微鏡系統(tǒng),主要考慮檢測(cè)器的靈敏度(信號(hào)與噪聲),圖像采集所需要的速度,以及標(biāo)本的可行性。相對(duì)較高的光照強(qiáng)度和較長(zhǎng)的曝光時(shí)間,通常采用固定的細(xì)胞和組織(如漂白是主要的考慮因素)中記錄圖像時(shí),必須嚴(yán)格避免與活細(xì)胞。在幾乎所有的情況下,活細(xì)胞顯微代表了一種妥協(xié)之間實(shí)現(xiàn)最佳的圖像質(zhì)量和保持健康的細(xì)胞。不必要的過采樣的時(shí)間點(diǎn),使細(xì)胞含量超標(biāo)的照明,空間分辨率和時(shí)間分辨率的實(shí)驗(yàn),而不是
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡,標(biāo)準(zhǔn)分辨率和性能問題
分辨率在光學(xué)顯微鏡通常由光學(xué)單元稱為瑞利判據(jù),它最初是制定確定的二維望遠(yuǎn)鏡的圖像分辨率的方法進(jìn)行評(píng)估,但已蔓延到在光學(xué)許多其他領(lǐng)域。瑞利準(zhǔn)則是在光從樣本生成的,并且是不依賴于用于產(chǎn)生所述圖像的放大率兩個(gè)點(diǎn)源之間的最小可分辨的距離來定義。 在一個(gè)二維圖像,兩個(gè)點(diǎn)源是可解析的,如果他們的艾里斑的衍射圖案是不同的。 根據(jù)瑞利準(zhǔn)則,兩個(gè)緊密間隔的艾里磁盤是不同的,如果他們是距離大于在其中的一個(gè)艾里斑的主
2020-09-03
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奧林巴斯顯微鏡,標(biāo)準(zhǔn)分辨率和性能問題
分辨率在光學(xué)顯微鏡通常由光學(xué)單元稱為瑞利判據(jù),它最初是制定確定的二維望遠(yuǎn)鏡的圖像分辨率的方法進(jìn)行評(píng)估,但已蔓延到在光學(xué)許多其他領(lǐng)域。瑞利準(zhǔn)則是在光從樣本生成的,并且是不依賴于用于產(chǎn)生所述圖像的放大率兩個(gè)點(diǎn)源之間的最小可分辨的距離來定義。 在一個(gè)二維圖像,兩個(gè)點(diǎn)源是可解析的,如果他們的艾里斑的衍射圖案是不同的。 根據(jù)瑞利準(zhǔn)則,兩個(gè)緊密間隔的艾里磁盤是不同的,如果他們是距離大于在其中的一個(gè)艾里斑的主
2020-09-03
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尼康顯微鏡:活細(xì)胞成像的光學(xué)系統(tǒng)和探測(cè)器的要求
在活細(xì)胞的調(diào)查設(shè)計(jì)的光學(xué)顯微系統(tǒng)時(shí),主要考慮因素是檢測(cè)器的靈敏度(信號(hào) - 噪聲),所需要的圖像采集速度,和標(biāo)本的可行性。相對(duì)較高的光強(qiáng)度和較長(zhǎng)的曝光時(shí)間,通常采用在記錄圖像固定的細(xì)胞和組織(如漂白為主要考慮因素),必須嚴(yán)格避免工作時(shí),與活細(xì)胞。在幾乎所有的情況下,活細(xì)胞顯微鏡代表實(shí)現(xiàn)最佳的圖像質(zhì)量,并保持健康的細(xì)胞之間的一種折衷。不必要的采樣時(shí)間點(diǎn),使細(xì)胞過度的照明水平,而不是實(shí)驗(yàn)設(shè)置的時(shí)空分辨
2020-09-03