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奧林巴斯顯微鏡，標(biāo)準(zhǔn)分辨率和性能問題
分辨率在光學(xué)顯微鏡通常由光學(xué)單元稱為瑞利判據(jù)，它最初是制定確定的二維望遠(yuǎn)鏡的圖像分辨率的方法進(jìn)行評估，但已蔓延到在光學(xué)許多其他領(lǐng)域。瑞利準(zhǔn)則是在光從樣本生成的，并且是不依賴于用于產(chǎn)生所述圖像的放大率兩個點(diǎn)源之間的最小可分辨的距離來定義。 在一個二維圖像，兩個點(diǎn)源是可解析的，如果他們的艾里斑的衍射圖案是不同的。 根據(jù)瑞利準(zhǔn)則，兩個緊密間隔的艾里磁盤是不同的，如果他們是距離大于在其中的一個艾里斑的主
2020-09-03
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尼康顯微鏡物鏡的數(shù)值孔徑
?數(shù)值孔徑?（也稱為物方孔徑?）是一個值（通?？s寫為NA象征）最初是由阿貝的顯微鏡物鏡和聚光鏡定義。?它由下式給出了簡單的表達(dá)式：數(shù)值孔徑(NA) = n × sin(μ) or n × sin(α)注意：許多作者使用變量μ來指定一個半孔徑角，而其他使用更常見的術(shù)語α，并且在某些情況下，θ。在數(shù)值孔徑方程中，n表示物鏡前透鏡與試樣之間的介質(zhì)的折射率，μ，α是物鏡的半孔徑角。顯微鏡物鏡的數(shù)值孔徑，其
2020-09-03
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尼康顯微鏡，有效的放大倍率
?以觀察細(xì)標(biāo)本細(xì)節(jié)在光學(xué)顯微鏡下，存在的微小的功能必須有足夠的對比度和投影中間圖像間的角度是稍微大于人眼的角度分辨能力大。?在選定的數(shù)值孔徑，在顯微鏡提供的放大圖像，其具有大小等于人眼的分辨率極限，超過該點(diǎn)附加放大率不會導(dǎo)致甚至更小的樣品細(xì)節(jié)的分辨率。有效的倍率為物鏡/目鏡組合的范圍是由顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)的數(shù)值孔徑來定義。?有得到解決必要的細(xì)節(jié)的最小放大率存在的圖像，并且該值通常相當(dāng)任意設(shè)置為500倍
2020-09-03
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尼康顯微鏡的圖像亮度
不論在光學(xué)顯微鏡中使用的成像模式的，圖像的亮度是由物鏡，即數(shù)值孔徑的函數(shù)的聚光功率管。 正如照明亮度被聚光的工作數(shù)值孔徑的平方確定，試樣圖像的亮度正比于物鏡的數(shù)值孔徑的平方。不像在顯微鏡的照明系統(tǒng)的情況，但是，圖像的放大倍率也起著決定圖像亮度的重要作用。事實(shí)上，圖像亮度是成反比的橫向放大率的平方：圖像亮度∝ (NA/M)2其中，NA是物鏡的數(shù)值孔徑，M為放大倍數(shù)。 公式中給出的比例高于表達(dá)了透的
2020-09-03
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尼康顯微鏡物鏡的景深和焦深
?當(dāng)考慮到在光學(xué)顯微鏡的分辨率，大部分的重點(diǎn)放在上的點(diǎn)至點(diǎn)在垂直于光軸的橫向分辨率（圖1）。?向分辨率的另一個重要方面是在軸向（或縱向）拆分的物鏡，即測量平行于光軸，并且最經(jīng)常被稱為景深的分辨能力。軸向分辨率，如水平分辨率，僅通過物鏡的數(shù)值孔徑（圖2）決定的，與目鏡僅僅放大鏡解決，投影到中間像平面的細(xì)節(jié)。?正如在傳統(tǒng)的攝影，景深是通過從在焦點(diǎn)最近的物體面到最遠(yuǎn)的平面也同時在焦點(diǎn)的距離來確定。?在現(xiàn)
2020-09-03
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![尼康顯微鏡：熒光蛋白的成像參數(shù)]()
尼康顯微鏡：熒光蛋白的成像參數(shù)
迄今發(fā)現(xiàn)的熒光蛋白及衍生工具的廣泛用途相當(dāng)廣泛，并已成功地應(yīng)用在幾乎每一個生物學(xué)科從微生物系統(tǒng)生理學(xué)。這些獨(dú)特的探頭已經(jīng)證明是非常有用的記者在培養(yǎng)細(xì)胞和整個動物的基因表達(dá)研究。熒光蛋白在活細(xì)胞中，最常用的跟蹤本地化和動態(tài)的蛋白質(zhì)，細(xì)胞器，和其他細(xì)胞區(qū)室，以及細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)運(yùn)輸示蹤劑。很容易地完成了多種技術(shù)，其中包括尼康顯微鏡，寬視場，共聚焦和多光子顯微鏡，熒光蛋白的定量成像曝光細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的復(fù)雜性
2020-09-03
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![尼康顯微鏡：反射（落射）光照明]()
尼康顯微鏡：反射（落射）光照明
也許最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)，這適用于所有形式的光學(xué)顯微鏡觀察標(biāo)本的照明和感興趣的特點(diǎn)，揭示其有效性的方法。往往利用體視顯微鏡下檢查標(biāo)本反映（落射）和透射（透射）照明計(jì)劃，采用多種光源和配置在適當(dāng)?shù)奈恢?，這是戰(zhàn)略定位。在很多情況下，反射和透射的光源相結(jié)合，以利用特定試樣的特性，更有效地揭示了感興趣的特征的方式。這次審查的重點(diǎn)各種各樣的技術(shù)和設(shè)備，目前在使用中，照亮了眾多的標(biāo)本觀察反射光技術(shù)。許多用體視顯微鏡標(biāo)
2020-09-03
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![奧林巴斯顯微鏡：熒光顯微鏡攝影的錯誤]()
奧林巴斯顯微鏡：熒光顯微鏡攝影的錯誤
顯微攝影在熒光照明條件下，提出了一套獨(dú)特冒充顯微鏡的特殊問題的情況。曝光時間往往是非常長的（在某些情況下運(yùn)行多少秒到幾分鐘），試樣的熒光可能會在曝光過程中褪色，全黑的背景往往在不經(jīng)意間光信號米建議過度曝光。此外，熒光的標(biāo)本發(fā)出他們自己的光，和顆粒位于所需的焦點(diǎn)平面的上方和下方往往輻射光造成圖像細(xì)節(jié)模糊。盡管熒光圖像可能會顯得明亮?xí)r，通過顯微鏡目鏡（由于人眼對光線的敏感度的精致），它們通常需要較長的
2020-09-03
