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尼康顯微鏡:EPI-熒光照明光路
直到最近,熒光照明是一個選項僅適用于配備專門的高數(shù)值孔徑物鏡的研究級復(fù)合顯微鏡。這一技術(shù)在立體顯微鏡的需要不斷升級與引進的編碼基因和生物特異性熒光蛋白GFP(綠色熒光蛋白)等。體視顯微鏡的應(yīng)用GFP觀察現(xiàn)在是如此普遍,立體聲熒光照明,更經(jīng)常被稱為GFP照明,即使他們可以利用許多其他應(yīng)用在生命科學(xué)和電子制造業(yè)。大幼蟲,線蟲,斑馬魚,卵母細胞和成熟的昆蟲標本,如可以方便地選擇和操作時,他們GFP標記的
2020-09-04
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徠卡顯微鏡:立體顯微鏡和圖像分析的開創(chuàng)性發(fā)明
一百年前,在1913年,的OPTISCHE Werke公司恩斯特·徠茲韋茨拉爾徠卡顯微系統(tǒng)CMS GmbH公司的前身,提出了兩項發(fā)明,為現(xiàn)代顯微鏡殺出的蹤跡:定量顯微鏡雙目鏡筒和整合階段。縱觀400年歷史的顯微鏡,顯微鏡也一直希望能夠用兩只眼睛看他們的樣本。光學(xué)和機械工程師,他們大多來自法國和英國,不停地制訂解決這個問題,但他們有一些嚴重的缺點,解析力方面。這些早期的雙目顯微鏡設(shè)計根據(jù)幾何光束分離
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡:什么是熒光?
當試樣,活的或非活的,有機或無機,吸收和后來重新煥發(fā)燈,這個過程描述為光致發(fā)光。如果光的發(fā)射,激發(fā)能量(光)后,便不再持續(xù)幾秒鐘,該現(xiàn)象被稱為磷光。熒光,在另一方面,描述了光發(fā)射的激發(fā)光的吸收僅在繼續(xù)。激發(fā)光的吸收和再輻射光熒光發(fā)射的時間間隔是異常持續(xù)時間短,一般不超過百萬分之一秒。熒光的現(xiàn)象是19世紀所產(chǎn)生。英國科學(xué)家Sir George G. Stokes首先觀察礦物螢石具有熒光,用紫外光照射
2020-09-04
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尼康顯微鏡:隨機光學(xué)重建顯微鏡(STORM)
所提供的寬視場的多個成像模式中,激光點掃描共聚焦,多光子熒光顯微鏡允許非侵入性的,固定和活細胞和組織中有高水平的特異性生化時間分辨成像。盡管傳統(tǒng)的熒光顯微鏡的優(yōu)點,該技術(shù)在超微結(jié)構(gòu)的調(diào)查,由于光的衍射,可以與標準的目標捕獲的信息量限制設(shè)置的分辨率極限的阻礙。在過去的幾年中,已經(jīng)采用了一些新穎的儀器為基礎(chǔ)的方法來規(guī)避衍射極限,包括近場掃描光學(xué)顯微鏡(NSOM),受激發(fā)射損耗(STED)顯微鏡,
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡:鏡子的介紹
鏡子是被人利用,利用光的力量,也許是最古老的光學(xué)元件,甚至早于原油鏡頭。史前穴居迷住了他們的倒影在未受干擾的池塘和其他水體,但毫無疑問,直到埃及金字塔文物可以追溯到公元前1900年左右進行了檢查,沒有發(fā)現(xiàn)最早的人造鏡。在希臘 - 羅馬時期和中世紀鏡由高度拋光的金屬,如青銅,錫,銀,塑造成微微凸起的磁盤,提供超過一千年的人類。而不是直到晚12或早期第十三世紀中使用玻璃與金屬背襯的開發(fā)是為了尋找眼鏡,
2020-09-04
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尼康顯微鏡:顯微物鏡的屬性
三個關(guān)鍵的設(shè)計特點的物鏡顯微鏡的極限分辨率極限。這些包括用來照亮試樣的孔徑角的光錐物鏡捕獲,和對象空間中的物鏡前透鏡和被檢體之間的折射率的光的波長。圖1中顯示的是通過一個簡單的雙透鏡的阿貝聚光照明顯微鏡的物鏡的剖開圖。光通過聚光鏡被組織成一個光錐到樣品上發(fā)出,然后被發(fā)送到物鏡前透鏡元件作為反錐形。照明錐的大小和形狀是一個函數(shù)的組合的物鏡和聚光鏡的數(shù)值孔徑。物鏡的孔徑角是由希臘字母θ表示,將在下面詳
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡:物鏡的數(shù)值孔徑和分辨率
顯微鏡物鏡的數(shù)值孔徑是其收集光并解決細標本細節(jié)在一個固定的物體距離的能力的量度。圖象形成光波穿過試樣和在倒置錐體進入物鏡,如圖1這個錐形光的縱向切片顯示了孔徑角,是由物鏡的焦距確定的值。角μ是二分之一的數(shù)值孔徑角(A),它與通過以下等式的數(shù)值孔徑:數(shù)值孔徑 (NA) = n(sin μ)其中n是物鏡的前透鏡和試樣玻璃蓋,一個值,該范圍為1.00空氣1.51專門浸沒油之間的成像介質(zhì)的折射率。許多作者
2020-09-04
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尼康顯微鏡,什么是共振掃描激光共聚焦顯微鏡?
激光掃描共聚焦顯微鏡已被證明是對固定和染色的細胞,組織中一個有用的工具,甚至整個生物體的光來源于區(qū)域從焦平面將消除高對比度。熒光蛋白在活細胞成像,然而越來越多的應(yīng)用,現(xiàn)在需要顯微鏡的成像速度為毫秒級解開在許多生物過程中發(fā)生的復(fù)雜的動力學(xué)。不幸的是,傳統(tǒng)的激光掃描共聚焦顯微鏡由電流計鏡有限的采集速度,這是一個線性鋸齒控制信號以每像素幾微秒的速度驅(qū)動。這意味著掃描速率范圍從500毫秒到2秒,取決于圖像
2020-09-04