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![尼康顯微鏡：多色共聚焦顯微鏡的光學(xué)像差和物鏡選擇]()
尼康顯微鏡：多色共聚焦顯微鏡的光學(xué)像差和物鏡選擇
優(yōu)化的設(shè)計簡化了激光共聚焦顯微鏡的程度上，它已經(jīng)成為一個標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞生物學(xué)研究工具。然而，激光共聚焦顯微鏡變得更加強(qiáng)大，他們也變得更加苛刻的光學(xué)元件的。事實上，導(dǎo)致圖像質(zhì)量的細(xì)微瑕疵廣角鏡的光學(xué)像差可以產(chǎn)生毀滅性的影響，在激光共聚焦顯微鏡。不幸的是，通常是隱藏的嚴(yán)格的光學(xué)要求，激光共聚焦顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)，保證了一個清晰的圖像，即使在顯微鏡是表現(xiàn)不佳。光學(xué)制造商提供了廣泛的顯微鏡物鏡，分別為特定應(yīng)用設(shè)
2020-09-04
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![尼康顯微鏡：EPI-熒光照明光路]()
尼康顯微鏡：EPI-熒光照明光路
直到最近，熒光照明是一個選項僅適用于配備專門的高數(shù)值孔徑物鏡的研究級復(fù)合顯微鏡。這一技術(shù)在立體顯微鏡的需要不斷升級與引進(jìn)的編碼基因和生物特異性熒光蛋白GFP（綠色熒光蛋白）等。體視顯微鏡的應(yīng)用GFP觀察現(xiàn)在是如此普遍，立體聲熒光照明，更經(jīng)常被稱為GFP照明，即使他們可以利用許多其他應(yīng)用在生命科學(xué)和電子制造業(yè)。大幼蟲，線蟲，斑馬魚，卵母細(xì)胞和成熟的昆蟲標(biāo)本，如可以方便地選擇和操作時，他們GFP標(biāo)記的
2020-09-04
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![尼康顯微鏡：在多光子激發(fā)顯微術(shù)的基本原理和應(yīng)用]()
尼康顯微鏡：在多光子激發(fā)顯微術(shù)的基本原理和應(yīng)用
雙光子激發(fā)顯微鏡（也稱為非線性的，多光子或雙光子激光掃描顯微鏡）是一種替代共聚焦和去卷積顯微鏡三維成像，提供了明顯的優(yōu)勢。特別是，雙光子激發(fā)成像擅長的活細(xì)胞，尤其是在完整的組織，如腦切片，胚胎，整個器官，甚至整個動物。有效靈敏度的熒光顯微鏡，特別是與厚的樣品，通常是有限的焦點外的喇叭形。此限制，大大降低了在共聚焦顯微鏡中，通過使用共焦針孔拒絕焦點外的背景熒光，并產(chǎn)生薄（小于1微米），unblurr
2020-09-04
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![尼康顯微鏡：隨機(jī)光學(xué)重建顯微鏡（STORM）]()
尼康顯微鏡：隨機(jī)光學(xué)重建顯微鏡（STORM）
所提供的寬視場的多個成像模式中，激光點掃描共聚焦，多光子熒光顯微鏡允許非侵入性的，固定和活細(xì)胞和組織中有高水平的特異性生化時間分辨成像。盡管傳統(tǒng)的熒光顯微鏡的優(yōu)點，該技術(shù)在超微結(jié)構(gòu)的調(diào)查，由于光的衍射，可以與標(biāo)準(zhǔn)的目標(biāo)捕獲的信息量限制設(shè)置的分辨率極限的阻礙。在過去的幾年中，已經(jīng)采用了一些新穎的儀器為基礎(chǔ)的方法來規(guī)避衍射極限，包括近場掃描光學(xué)顯微鏡（NSOM），受激發(fā)射損耗（STED）顯微鏡，
2020-09-04
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![尼康顯微鏡：顯微物鏡的屬性]()
尼康顯微鏡：顯微物鏡的屬性
三個關(guān)鍵的設(shè)計特點的物鏡顯微鏡的極限分辨率極限。這些包括用來照亮試樣的孔徑角的光錐物鏡捕獲，和對象空間中的物鏡前透鏡和被檢體之間的折射率的光的波長。圖1中顯示的是通過一個簡單的雙透鏡的阿貝聚光照明顯微鏡的物鏡的剖開圖。光通過聚光鏡被組織成一個光錐到樣品上發(fā)出，然后被發(fā)送到物鏡前透鏡元件作為反錐形。照明錐的大小和形狀是一個函數(shù)的組合的物鏡和聚光鏡的數(shù)值孔徑。物鏡的孔徑角是由希臘字母θ表示，將在下面詳
2020-09-04
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尼康顯微鏡，什么是共振掃描激光共聚焦顯微鏡？
激光掃描共聚焦顯微鏡已被證明是對固定和染色的細(xì)胞，組織中一個有用的工具，甚至整個生物體的光來源于區(qū)域從焦平面將消除高對比度。熒光蛋白在活細(xì)胞成像，然而越來越多的應(yīng)用，現(xiàn)在需要顯微鏡的成像速度為毫秒級解開在許多生物過程中發(fā)生的復(fù)雜的動力學(xué)。不幸的是，傳統(tǒng)的激光掃描共聚焦顯微鏡由電流計鏡有限的采集速度，這是一個線性鋸齒控制信號以每像素幾微秒的速度驅(qū)動。這意味著掃描速率范圍從500毫秒到2秒，取決于圖像
2020-09-04
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尼康顯微鏡，偏振光的干擾
在顯微鏡的圖像的形成依賴于兩個關(guān)鍵的光學(xué)現(xiàn)象：衍射和干涉之間復(fù)雜的相互作用。 的標(biāo)本的光通過散射和衍射成微小的細(xì)節(jié)和功能存在于試樣中的發(fā)散波的。 由試樣散射的光的發(fā)散被捕獲的目標(biāo)和聚焦到中間圖像平面，其中疊加的光波通過的過程中， 干擾重組或求和，以產(chǎn)生一個放大的圖像的標(biāo)本。發(fā)生的衍射和干涉的表面上密切的關(guān)系，因為它們實際上是表現(xiàn)為相同的物理過程，并產(chǎn)生表面上是相互影響的。 我們大多數(shù)人觀察到某種類
2020-09-04
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尼康顯微鏡，熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）顯微鏡與熒光蛋白的基本原理
在活細(xì)胞中，動態(tài)的蛋白質(zhì)之間的相互作用被認(rèn)為是發(fā)揮了關(guān)鍵作用，調(diào)節(jié)許多信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，以及廣泛的其他關(guān)鍵流程。 在過去，經(jīng)典的生物化學(xué)方法，闡明了這種相互作用的機(jī)制是司空見慣，但是弱的或短暫的相互作用，可能會發(fā)生細(xì)胞內(nèi)的天然環(huán)境是這些技術(shù)通常是透明的。 例如，合作一直懷疑蛋白本地化合作伙伴使用固定細(xì)胞免疫熒光顯微鏡檢查相互作用在原地 ，并已提交了大量的文獻(xiàn)報道基于這種技術(shù)的常用方法。 然而，由于在
2020-09-04
