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什么是熒光顯微鏡？
熒光顯微鏡(Fluorescence microscope) ： 熒光顯微鏡是以紫外線為光源， 用以照射被檢物體， 使之發(fā)出熒光， 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細胞內(nèi)物質的吸收、運輸、化學物質的分布及定位等。 細胞中有些物質，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒光；另有一些物質本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光，熒光顯微鏡就是對這
2020-09-04
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常用于免疫熒光組織化學染色的熒光素
常用于免疫熒光組織化學染色的熒光素有：異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate，F(xiàn)ITC)、四甲基異硫氰酸羅丹明(tetramethyl rhodamine isothioeyanate，TRITC)、四乙基羅丹明(tetraethyl rhodamine B200，RB200)、得克薩斯紅(Texas red)、藻紅蛋白(phycoerythrin，PE)、花青類(c
2020-09-04
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![熒光共振能量轉移（FRET）]()
熒光共振能量轉移（FRET）
活細胞研究遇到的問題： 蛋白質或其他分子在活細胞內(nèi)互相結合的時間和地點是了解它們功能的關鍵問題。要回答這一問題，需將蛋白質標上不同的熒光團。但是，光學顯微鏡的分辨率將蛋白質檢測精度限制在大約0.2μm左右。要研究蛋白質成分的相互物理作用，需要高的分辨率。二、什么是FRET？FRET就是采用非放射方法，在供體和受體相互靠得很近（1-10 nm）時，將光子能從一個受激發(fā)的熒光團（供體）轉移到另一個熒
2020-09-04
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![熒光顯微鏡檢測原理及方法]()
熒光顯微鏡檢測原理及方法
熒光顯微鏡檢測方法一、熒光顯微鏡熒光顯微鏡是免疫熒光細胞化學的基本工具.它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學系統(tǒng)等主要部件組成.是利用一定波長的光激發(fā)標本發(fā)射熒光,通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標本的熒光圖像(圖3-1). ?(一)光源 現(xiàn)在多采用200W的超高壓汞燈作光源,它是用石英玻璃制作,中間呈球形,內(nèi)充一定數(shù)量的汞,工作時由兩個電極間放電,引起水銀蒸發(fā),球內(nèi)氣壓迅速升高,當水銀完全蒸發(fā)時,可達50～7
2020-09-04
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![如何制作熒光顯微鏡標本]()
如何制作熒光顯微鏡標本
一、熒光顯微鏡標本制作要求 (一)載玻片 載玻片厚度應在0.8～1.2mm之間，太厚的坡片，一方面光吸收多，另一方面不能使激發(fā)光在標本上聚集。載玻片必須光潔，厚度均勻，無明顯自發(fā)熒光。有時需用石英玻璃載玻片?！ ?二)蓋玻片 蓋玻片厚度在0.17mm左右，光潔。為了加強激發(fā)光，也可用干涉蓋玻片，這是一種特制的表面鍍有若干層對不同波長的光起不同干涉作用的物質(如氟化鎂)的蓋玻片，它可以使熒光順
2020-09-04
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![奧林巴斯熒光顯微鏡使用方法]()
奧林巴斯熒光顯微鏡使用方法
這里將以奧林巴斯BX53和BX43熒光顯微鏡為例，來做分析。System Microscope BX53 奧林巴斯和尼康的三波段激發(fā)的熒光濾光片組合包括兩個很精確的平衡組合(DAPI-FITC-TRITC和DAPI-FITC-Texas Red)，每個組合包括三個帶通的發(fā)射區(qū)域，可以選擇性的通過藍色、綠色、黃色、橙色和紅色光譜區(qū)的激發(fā)光。這樣的相互輔助作用就可以探究激發(fā)濾光片和發(fā)射濾光片光譜
2020-09-04
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![熒光顯微鏡技術]()
熒光顯微鏡技術
顯微鏡光學技術對顯微結構與顯微變化是極為重要的工具.熒光物質 ( 熒光染劑 ) 受到較短波長的光 ( 如 FITC : Ex:488 nm ) 及足夠的能量所激發(fā), 當要回到穩(wěn)態(tài)的能階時, 會釋出較長波長的熒光 ( 如 FITC : Em : 515 nm ), 非熒光物質則成為黑色的背景.自體熒光 ( auto-fluorescence )又稱為主要熒光 ( primary fluorescen
2020-09-04
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![徠卡顯微鏡熒光觀察法]()
徠卡顯微鏡熒光觀察法
熒光觀察法在醫(yī)學領域有著廣泛的用途，如免疫學研究的對象是抗原和抗體的反應問題，由于抗體反應的高度特異性，所以當抗原體發(fā)生反應時，只要知道其中一個因子，也就可以知道另一個因子。但是這個過程必須通過染色，熒光染色劑就應運而生。由于熒光染色的色素只需極稀的濃度便能使激發(fā)出明亮的熒光。因而，染色后不會破壞抗體（或抗原）原有的特異活性。其光學原理示意圖如下，以藍光激發(fā)為例：激發(fā)濾光片
2020-09-04
